RT-LAMP检测

公司简介
健明迪检测提供的RT-LAMP检测,RT-LAMP检测是一种核酸扩增技术,报告具有CMA,CNAS认证资质。
RT-LAMP检测是一种核酸扩增技术,全称为Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification(逆转录环介导等温扩增)。它主要用于快速、灵敏地检测病毒RNA,如新冠病毒等。
该方法结合了逆转录和LAMP(环介导等温扩增)两种技术。首先,通过逆转录酶将目标RNA转化为DNA(cDNA);然后,在恒定温度下,利用特殊设计的引物对cDNA进行多靶点、链置换式的扩增反应,使得特定区域的核酸序列在短时间内大量复制,实现对样本中目标核酸的高灵敏度检测。
相比传统的PCR检测,RT-LAMP检测具有操作简便、反应速度快、无需复杂的热循环设备、检测结果直观(可通过颜色变化或荧光信号判断)等优点,特别适用于现场快速筛查和资源有限的环境。
检测标准
RT-LAMP(Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification)是一种在恒温条件下进行的核酸扩增技术,常用于新冠病毒等RNA病毒的快速检测。其检测标准主要包括以下几个方面:
1. **特异性**:RT-LAMP反应体系设计应具有高度特异性,确保只能对目标序列进行有效扩增,避免非特异性产物的产生。
2. **灵敏度**:RT-LAMP方法通常要求较高的灵敏度,能检测到极低浓度的目标RNA。对于新冠病毒等病原体,一般要求检测限达到几十至几百拷贝/反应。
3. **准确性**:检测结果应与金标准如实时荧光RT-PCR有较高的一致性,即阳性样本的符合率和阴性样本的符合率均需达到一定的标准。
4. **稳定性与重复性**:同一份样本多次检测结果应保持一致,不同批次间的结果也应具有良好的重复性。
5. **操作便捷性与检测速度**:RT-LAMP法的一大优势是其操作简便、快速,一般在30-60分钟内即可完成检测。
具体的标准参数可能会因不同的应用领域和地区而有所差异,需要参照国家卫生健康委员会或世界卫生组织等相关机构发布的指南和标准执行。
检测流程
RT-LAMP(Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification)是一种新型的恒温核酸扩增技术,常用于新冠病毒等RNA病毒的快速检测。RT-LAMP检测流程大致如下:
1. 样本采集:首先由专业人员进行鼻咽拭子、口咽拭子或其他相关生物样本的采集。
2. 样本处理:在生物安全柜中对采集到的样本进行处理,包括样本裂解、RNA提取等步骤,以获取待测的RNA模板。
3. 逆转录反应:使用逆转录酶将RNA模板转化为cDNA。
4. LAMP反应体系配制:按照RT-LAMP试剂盒说明,将已转录得到的cDNA、引物、Bst DNA聚合酶、dNTPs以及缓冲液等混合配制成反应体系。
5. 恒温扩增:将配制好的反应体系放入恒温荧光PCR仪或水浴锅中,在恒定温度(通常为60-65℃)下孵育一段时间(一般30分钟至1小时),在此过程中,如果样本中含有目标病毒基因序列,则会在该条件下进行指数级扩增。
6. 结果判读:通过实时荧光监测或者电泳检测扩增产物,若在设定时间内出现显著荧光信号增强或电泳条带,表示样本中存在目标病毒核酸,即为阳性结果;反之则为阴性结果。
7. 出具报告:根据实验结果,由检测机构出具相应的检测报告。
以上是大致流程,具体操作可能因不同实验室和试剂盒而有所差异,务必遵循所使用的试剂盒说明书和实验室标准操作程序。
RT-LAMP检测
行业解决方案
我们的服务
官方公众号
客服微信

为您推荐
细胞活性试验

细胞活性试验

微生物穿透试验

微生物穿透试验

T淋巴细胞转化试验

T淋巴细胞转化试验

木材防虫检测

木材防虫检测