沙门氏菌回复突变试验
公司简介
健明迪检测提供的沙门氏菌回复突变试验，沙门氏菌回复突变试验（SalmonellaReverseMutationAssay），也被称为Ames试验，报告具有CMA,CNAS认证资质。
沙门氏菌回复突变试验（Salmonella Reverse Mutation Assay），也被称为Ames试验，是一种广泛应用于检测化学物质遗传毒性（特别是致突变性）的生物检测方法。该试验由美国科学家Bruce N. Ames在1970年代初创立。
在该试验中，使用特定的沙门氏菌菌株（如鼠伤寒沙门氏菌TA98、TA100等），这些菌株由于基因突变丧失了在基本培养基上生长的能力，但当接触具有致突变性的化学物质时，其DNA可能发生回复突变，使得菌株重新获得在含有特定营养缺陷型补充剂的培养基上生长的能力。
通过观察和计数在加入受试物后能够在培养基上生长的菌落数量，可以判断受试物是否存在致突变活性。此方法简单快捷，是目前全球公认的新化学品安全性评价中的重要手段之一。
检测标准
沙门氏菌回复突变试验（Ames test）是一种常用的检测化学物质是否具有潜在遗传毒性或致突变性的生物检测方法，其标准主要包括以下几个方面：
1. 实验菌株：通常采用几种特定的组氨酸缺陷型沙门氏菌 tester strains，如TA98、TA100、TA1535、TA1537和TA1538等，这些菌株在缺乏组氨酸的培养基上不能生长，但当DNA发生突变恢复了组氨酸合成能力时，则能在含硫酸胍（一种DNA损伤修复抑制剂）的培养基上形成可观察到的菌落。
2. 实验步骤：首先对受试物进行适当浓度的梯度稀释，然后将受试物与沙门氏菌混合，在含有微量组氨酸的预培养基中进行孵育。接着，将此混合物涂布于不含组氨酸且含有硫酸胍的平板上，再次孵育后计数产生回复突变的菌落数。
3. 结果判断：如果受试物处理组的回复突变菌落数显著高于对照组，则认为该受试物具有遗传毒性或致突变性。
4. 实验条件：实验应遵循严格的无菌操作，并需设立阴性对照（仅含菌株和培养基）、阳性对照（已知致突变物）以及溶剂对照（含菌株、培养基及受试物溶剂），以确保实验结果的有效性和可靠性。
以上是沙门氏菌回复突变试验的基本标准和流程，具体的执行需要参照国际标准化组织（ISO）、美国环保署（EPA）、经济合作与发展组织（OECD）等相关机构发布的具体指导文件和标准。
检测流程
沙门氏菌回复突变试验（Ames Test）通常用于检测化学品、药物、食品添加剂等物质是否存在潜在的遗传毒性。以下是大致的实验流程：
1. 菌株准备：选择具有特定指示基因缺陷的沙门氏菌菌株，如TA98、TA100等，这些菌株在正常条件下不能生长在缺乏组氨酸或色氨酸的培养基上。
2. 待测物处理：将待测物用溶剂溶解，并进行一系列浓度梯度稀释，以备后续试验使用。
3. 试验板制备：将已稀释的待测物加入到含有指示菌株的琼脂培养基中，同时设立阴性对照（仅含菌株和溶剂）、阳性对照（菌株+已知诱变剂）以及空白对照。
4. 倒板接种：将混合了待测物与菌株的培养基均匀倒入培养皿中，使其凝固后形成平板。
5. 孵育培养：将平板置于适宜温度下（一般为37℃）倒置培养16-24小时。
6. 菌落计数：观察并记录各平板上回复突变形成的可生长菌落（即能在缺乏氨基酸的培养基上生长的菌落），通过比较对照组和实验组的菌落数量来判断待测物是否具有致突变活性。
请注意，以上仅为常规流程概述，实际操作需严格遵循相关实验室安全规定及GLP（优良实验室规范）要求，确保结果准确可靠。
在该试验中，使用特定的沙门氏菌菌株（如鼠伤寒沙门氏菌TA98、TA100等），这些菌株由于基因突变丧失了在基本培养基上生长的能力，但当接触具有致突变性的化学物质时，其DNA可能发生回复突变，使得菌株重新获得在含有特定营养缺陷型补充剂的培养基上生长的能力。
通过观察和计数在加入受试物后能够在培养基上生长的菌落数量，可以判断受试物是否存在致突变活性。此方法简单快捷，是目前全球公认的新化学品安全性评价中的重要手段之一。
检测标准
沙门氏菌回复突变试验（Ames test）是一种常用的检测化学物质是否具有潜在遗传毒性或致突变性的生物检测方法，其标准主要包括以下几个方面：
1. 实验菌株：通常采用几种特定的组氨酸缺陷型沙门氏菌 tester strains，如TA98、TA100、TA1535、TA1537和TA1538等，这些菌株在缺乏组氨酸的培养基上不能生长，但当DNA发生突变恢复了组氨酸合成能力时，则能在含硫酸胍（一种DNA损伤修复抑制剂）的培养基上形成可观察到的菌落。
2. 实验步骤：首先对受试物进行适当浓度的梯度稀释，然后将受试物与沙门氏菌混合，在含有微量组氨酸的预培养基中进行孵育。接着，将此混合物涂布于不含组氨酸且含有硫酸胍的平板上，再次孵育后计数产生回复突变的菌落数。
3. 结果判断：如果受试物处理组的回复突变菌落数显著高于对照组，则认为该受试物具有遗传毒性或致突变性。
4. 实验条件：实验应遵循严格的无菌操作，并需设立阴性对照（仅含菌株和培养基）、阳性对照（已知致突变物）以及溶剂对照（含菌株、培养基及受试物溶剂），以确保实验结果的有效性和可靠性。
以上是沙门氏菌回复突变试验的基本标准和流程，具体的执行需要参照国际标准化组织（ISO）、美国环保署（EPA）、经济合作与发展组织（OECD）等相关机构发布的具体指导文件和标准。
检测流程
沙门氏菌回复突变试验（Ames Test）通常用于检测化学品、药物、食品添加剂等物质是否存在潜在的遗传毒性。以下是大致的实验流程：
1. 菌株准备：选择具有特定指示基因缺陷的沙门氏菌菌株，如TA98、TA100等，这些菌株在正常条件下不能生长在缺乏组氨酸或色氨酸的培养基上。
2. 待测物处理：将待测物用溶剂溶解，并进行一系列浓度梯度稀释，以备后续试验使用。
3. 试验板制备：将已稀释的待测物加入到含有指示菌株的琼脂培养基中，同时设立阴性对照（仅含菌株和溶剂）、阳性对照（菌株+已知诱变剂）以及空白对照。
4. 倒板接种：将混合了待测物与菌株的培养基均匀倒入培养皿中，使其凝固后形成平板。
5. 孵育培养：将平板置于适宜温度下（一般为37℃）倒置培养16-24小时。
6. 菌落计数：观察并记录各平板上回复突变形成的可生长菌落（即能在缺乏氨基酸的培养基上生长的菌落），通过比较对照组和实验组的菌落数量来判断待测物是否具有致突变活性。
请注意，以上仅为常规流程概述，实际操作需严格遵循相关实验室安全规定及GLP（优良实验室规范）要求，确保结果准确可靠。
