实验员分享微生物日常检验过程注意事项 关于微生物检测的内容以及检测标准的讲解 健明迪

一、培育基的灭菌及运用

（1）每次配置时，要留意其消费日期能否在保质期内，检查其开瓶日期及瓶口密封性，保证其未蜕变，并且未吸潮。

（2）培育基配置时，称量要准确，包括盐水的分装要准确。

（3）一定要保证现配制现灭菌，未灭菌的配好培育基不能长时间放置，更不可隔夜。

（4）灭菌时要保证恒温、恒压，同时要保证有效灭菌时间。

（5）灭菌过的培育基要冰箱保管，可保管一周，普通不超越 3 天。而且要遵照“先入先出”准绳，先配制的要先运用。

（6）在运用时，要依据当班次的运用量，用水浴锅先将培育基溶化为液态，然后及时调低水域温度（先化好的可从水域取出，放在水浴锅锅盖上）待用，千万不可长时间使培育基处于高温形状。

（7）做产品微生物检测时，倾倒培育基温度在 45℃左右，不可过烫，防止将菌烫死；也不可过凉，化好的培育基又结块凝结，方便于观察结果。

（8）每瓶培育基均要做空白。

（9）尽量集中做样，防止频繁翻开同一瓶培育基瓶塞，增大培育基的污染几率，出现误差结果。

（10）培育基剩余过少时，可先将其倾倒成空白用板。

二、 做样环境的维持

（1）大环境（房间）

1）做样时，窗户和空调要封锁，或用酒精对房间停止喷雾消毒，防止房间内空气流通影响平安柜外部环境（*好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间停止操作）。

2）假设在原来的原料微生物检测室停止做样，要活期开启紫外灯，对房间停止杀菌。

（2）小环境（生物平安柜）

1）任务前预备

a. 首先紫外灯照射30分钟

b. 关紫外灯，翻开平安柜的日光灯和风机，用消毒剂对生物平安柜的内外表停止消毒擦拭

c. 将实验中需求用到的物品集中用消毒剂擦拭后放在台面相应位置上（切记勿阻挠风口！）

d. 等候5min，污染任务区的空气污染物

2）操作规范

a. 双臂垂直缓慢进入前面的启齿，在生物平安柜中等候大约一分钟，以使平安柜调整终了后才可对物品停止处置。

b. 一切操作应在离前窗10cm以外的任务区停止。

c. 废弃物应丢弃在生物平安柜内的处置容器中。

3）操作时留意事项

a. 双防止胳膊在前启齿处快速移动和频繁进出

b. 尽量防止污染的物品进入洁净区

c. 防止运用明火搅扰气流，可运用微型电加热器，*好运用一次性接种环。

d. 在生物平安柜内停止操作时，不能停止文字任务

e. 尽量增加操作者身后的人员活动。

4）任务完毕后的要求

a. 将平安柜继续运转至少3min来完成“污染”进程

b. 将柜内物品移出前，应运用有效的消毒剂擦拭（特别是霉菌）

c. 每天实验完毕后，对生物平安柜的内壁和台面停止擦拭

d. 等候5分钟后，封锁前窗，关灯，关风机，紫外灯照射30分钟

三、 工用具的洁净度

（1）玻璃器皿：采用干热灭菌方式停止灭菌。

（2）做样用剪刀、勺子等物品要做到做样公用，不可与其它操作用具混用，运用时，先用75%酒精消毒，再采用灼烧方式停止灭菌。

（3）接种针（环）采用灼烧方式停止灭菌，但要留意做样时要先将接种针（环）停止冷却。

四、样品的采集及检测

（1）保证采样用具的无菌性

1）玻璃器皿：采用干热灭菌方式停止灭菌，保证恒温、时间足够（但不可时间过长，招致玻璃器皿易裂纹而报废）。

2）取样筐：运用前要用75%酒精停止喷洒消毒。

3）取样勺：要保证其清洁消毒，清洁后用75%酒精停止擦拭消毒。

4）取样袋：可先用酒精停止擦拭消毒，再在平安柜用紫外灯照射消毒，（包卸车间要在传递窗用紫外灯照射消毒）。

5）电子称外表用 75%酒精消毒。

（2）人员操作

1）保证手部的清洗、消毒：取样前及做样前都要先洗手再消毒。

2）取样要具有代表性（随机样、目的样、综合样）且要标示清楚。

3）取样终了，不可在车间逗留，要及时将样品放入平安柜，对其外表面停止紫外灯照射消毒。

4）在要求的做样区域停止操作。

5）做样前，要用 75%酒精棉球对样品袋口部停止擦拭消毒，再启齿。

6）往盐水瓶加样品时，要留意勺子或袋子尽量不接触瓶口。

7）样品计量要准确，稀释倍数也要准确（1mL 吸管不允许将管口敲掉），停止 100 倍稀释时，1mL 吸管要伸入盐水中，不可以将样品从管壁流下去，同时要防止将管底部捅破。

8）盐水温度以 40℃左右为宜，不能过热，会将局部微生物烫死；也不能温度太低，不能将样品溶解完全。

9）停止稀释时，要摇匀，保证溶液的均一性。

10）倾倒平皿时，要留意培育基瓶口不要接触到平皿；倾倒的培育基要过量，不可以太少，在培育进程中干掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右为宜。

11）做大肠菌群样时，要提早将乳糖胆盐培育基培育管按需求量备好，放入平安柜对外表面停止紫外线灭菌。

12）接二步时，要留意先将接种针（环）停止冷却，防止出现接不上菌落的状况发作，招致无法判别、确认。

13）做样终了，及时放入相应培育箱停止培育，并清算清洁平安柜。

五、 微生物的培育

（1）在培育进程中，要随时监控培育箱温度，保证其在适宜的温度停止培育。

（2）要依照《微生物检验规范》要求及时观察结果，出现异常，要及时剖析缘由停止反应。

一、微生物实验室留意事项 1、任务室要矮小平整、润滑、无凹凸不平或棱角、四壁及屋顶用不透水之材质，便于擦洗及杀菌。 2、室内采光面积应大，从室外应能看到室内的状况。 3、为保证无菌室的洁净，无菌室周围需设缓冲走廊，走廊旁再设缓冲间，其面积可小于无菌室。 4、无菌室、缓冲走廊及缓冲间均设有日光灯及紫外灯，杀菌紫外灯离任务台以一米为宜，其电源开关应设在室外。 5、无菌室与缓冲间进出口应设推拉门，门与窗平齐，门缝要封紧，两门要错开，以免空气对流形成污染。 二、运用无菌室留意事项 1、无菌室要坚持清洁划一，室内仅寄存*必需的检验用品，如：酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、记号铅等。 2、室内检验用具及桌凳应坚持固定位置，不随意移动。 3、每2周用2%消毒液（二氧化氯等）水溶液擦拭任务台、门、窗、桌凳及空中，然后用二氧化氯溶液喷雾消毒空气或过氧乙酸熏蒸，*后紫外灯杀菌。 4、活期反省室内空气无菌形状，停止细菌和霉菌的反省。 5、无菌室杀菌前应将一切物品置于操作之部位，然后翻开紫外灯杀菌半小时，时间一到，封锁紫外灯待用。 6、操作应严厉依照无菌操作规则停止，操作少说话，不喧哗，以坚持环境的无菌形状。 三、配制培育基留意事项 1、灭菌时严厉依照规则加热、加压，切忌时间过长压力过高，否则会形成营养成分的破坏。 2、切忌运用铜锅、铁锅配制培育基。 3、培育基不能二次高压灭菌。 4、划线用培育基可放入冰箱或培育箱除去水分。 四、无菌操作留意事项 1、进入无菌室之前先停止空气消毒，任务人员进入无菌室以前，必需于缓冲间改换消毒过的任务服、任务帽及任务鞋。 2、举措要轻，尽量增加走动，以免搅动空气。 3、操作要接近酒精灯火焰区，运用吸管要用吸球。 4、接种环/接种针用前用后停止火焰灭菌。 5、任务完毕作好终末消毒，一切培育物均应高压灭菌后再扔掉，以免污染环境。 五、菌落总数测定留意事项 1、选取样品要有代表性，如为固体样品要多采几个部位，液体检样要混匀。 2、每次做样从末尾到完毕都要停止超净台空气净度的监测，同时对一切灭菌物品做空白对照。 3、为增加稀释倍数的误差，在做延续递增稀释时，每一稀释液应充沛振摇使其平均，同时每一稀释度换一支吸管。 4、在停止延续稀释时，应将吸管内液体沿壁流入，勿使吸管*触及稀释液。 5、倾倒营养琼脂培育基平板时，温度要在46±1℃之间，数量要在15ml左右为宜，不要太多太少。 6、培育物48h培育后培育基失重不超越15%，培育箱内要放水。 7、检样参与平皿后应立刻倾注培育基并旋转混匀，普通从稀释到倾注不超越20分钟。 8、平皿内如有链状菌落生长时：菌落之间无清楚界限且仅有一条链可视为一个菌落，如为不同来源的几条链则将每条链各做一个菌落记。 9、做菌落记数时平板里一切的菌落都要记数。 六、大肠菌群留意事项 1、对乳糖胆盐管产气的观察只需有气泡往上冒就算产气。 2、在伊红美兰琼脂平板上挑取菌落时一定要选典型菌落。 七、霉菌、酵母菌检验留意事项 1、稀释样品时用无菌水。 2、3天观察时把一切的酵母菌做标志。 3、假设有霉菌被培育出，请不要把皿盖随意翻开，待培育物高压灭菌后再清洗。 八、坏包剖析留意事项 1、对已开包的酸包胀包要马上转移到无菌瓶中，已防二次污染。 2、依据坏包的不同表现形状适当的选择培育项目。 3、做微生物培育的同时测定感官、理化目的，留意其有何变化。 九、商业无菌留意事项 1、要求有厌氧培育的一定要在厌氧环境下培育。 2、取样测pH值，要与同批正常样相比，看能否有清楚差异。 3、对pH 值有可疑的样品都要做涂片染色镜检，与同批正常样相比，看能否有清楚的微生物增殖现象。 4、保温时期出现的胀包，漏包、或开包发现PH、感官异常、糜烂蜕变，进一步镜检发现有异常数量细菌的样品均应停止划线培育。

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需求用光学显微镜或电子显微镜观察肉眼看不清的小生物就叫微生物了。但有些微生物是肉眼可见的，如属于真菌的蘑菇、灵芝等。病毒是由核酸和蛋白质等几种成分组成的“非细胞生物”，但生活要依赖活细胞。依据存在的环境分为空间微生物、陆地微生物等，依据细胞结构分为原核微生物和真核微生物。下面给大家引见下微生物检测都有哪些？微生物检测的国度规范的是什么。

微生物检测有哪些

菌落总数、大肠杆菌计数、大肠菌群计数、肠道致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌)、单核细胞增生李斯特氏菌、双岐杆菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、霉菌计数和酵母计数。

微生物检测国度规范

1、

规范号：JB/T20179-2017

规范称号：微生物限制检验仪

规范形状：有效

规范类型分类：行业规范>>机械规范

JBICS分类：医药卫生技术>>制药学

CCS分类：医药、卫生、休息维护>>制药、平安机械与设备

2、

规范号：NY227-1994

规范称号：微生物肥料

规范形状：被替代

规范类型分类：行业规范>>农业规范NY

3、

规范号：GB20287-2006

规范称号：农用微生物菌剂

规范形状：有效

规范类型分类：国度规范>>国度规范

GBICS分类：农业>>杀虫剂和其他农用化工产品

CCS分类：农业、林业>>土壤与肥料 微生物检测流程 1、寄样；2、初检；3、报价；4、签署失密协议；5、末尾实验；6、完毕实验；7、前期效劳。 以上就是小编为大家带来的关于微生物检测有哪些和微生物检测国度规范的相关内容引见，希望对大家可以有所协助！健明迪检测是中科院旗下独立的第三方检测机构，具有市场监视管理局授权的CMA资质和中国合格评定认可委员会认可的CNAS资质，并荣获高新技术企业等荣誉称号。

• 背景

1）*近看到了一些消费级别的团体微生物检测报告，发现其实这些报告下面的检测，概念说明及结果解读等等其实还挺专业，对相关专业人员来说，挺容易阅读的。但是关于普通民众来说还是太笼统的概念了，不接地气，就是有种看不见摸不着的觉得。

2）看到他人有全程微观录观特定的微生物生长的视频的，特别奇特和美丽。

• 我的奇思妙想

为什么不把客户样本中提取分别的微生物群，在培育皿(或模拟肠道)中培育几天，延续拍照或许录视频，直播展现给客户看呢？ 有清楚疾病的样本中的微生物群的生成状况，能够很异与安康正常人， 那拿到视频看到自己微生物群异常生成的消费者是不是愈加印象深入，及加紧举动来挽救安康呢？ 改善安康进程中追踪自己的微生物群生长变化，能否愈加有成就感呢？

值得等候一下！