一名研究生，做从土壤中筛选微生物课题，难度如何，文章容易发么  微生物检测 抗菌检测、防霉检测、除菌检测、除螨检测、除过敏原检测和除病毒检测 健明迪

实验室霉菌检测中罕见效果

霉菌：不是分类学上的名词，而是一些丝状真菌的通称，属真菌的一局部；其对人类具有双重性，有利的方面是它可以用来酿造、工业发酵、抗生素和酶制剂的消费等，不利方面是它能惹起农副产品、食品、原料及器材的腐朽，也感染并惹起人类和动、植物的多种疾病，少数种类，如黄曲霉，能发生黄曲霉毒素，黄曲霉毒素是一种致癌物质，危害人、畜的安康和生命。因此，霉菌的检测关于食品的平安性很重要。

食品中罕见的霉菌：毛霉属、根霉属、曲霉属、青霉属等。

检测中的留意事项：

1、 取样的代表性。

2、 取样工具的无菌。空气中霉菌的孢子含量很高，所以，取样的工具、容器等要经过严厉的高压灭菌。

3、 检样的方法。 (1)、由于霉菌易被携带，所以，检样时操作人员应尽量防止自身携带的能够。 (2)、样品的均质及充沛振摇。由于有些孢子是连成串的，故均质和振摇能使其充沛散开，同时，在各梯度延续稀释时，也要用灭菌吸管重复吹吸几次，使孢子充沛散开。

4、培育温度和时间。培育温度25-28℃培育，3天后观察，需培育观察一周。

霉菌检验中常用的培育基：孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂等。

5、检样中罕见的效果。

(1) 不同稀释度计数结果相反；

(2) 不生长或生长很好连成片无法计数；

缘由： (1) 稀释时未经重复振摇，吹吸，招致孢子未充沛散开，影响了计数的结果。 (2) 由于培育基不适宜，PH值高等，致使生长较慢。 (3) 观察时间的掌握。真菌生长较慢，故需3d后才干观察出结果。每天都要观察结果。

微生物操作中罕见效果的讨论与剖析

1、 划线取得单个菌落的方法。划不出单个菌落的缘由： (1) 平板上有过多的水分； (2) 划线时接种环未经重复灼烧； (3) 多区划线，三区或四区划线。

2、 涂布和倾注的区别：涂布利于观察，但由于涂布棒上会带有大批的菌液，影响计数的准确性；涂布更为准确，但不利于观察菌落的形状。

3、 培育基配制时应留意的效果： (1) 灭菌温度要严厉控制，依照要求灭菌，尤其含糖量较高的培育基温度不应太高，过高会招致糖分焦化，影响质量； (2) 琼脂培育基不能重复溶化。重复溶化会破坏培育基中的营养成分； (3) 培育基不能重复灭菌，重复灭菌也会招致营养成分的破坏； (4) 含琼脂的培育基灭菌后，要摇匀。

4、 平板的保管：大少数平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、显色系列等要避光高温保管。

5、 产品的保管： (1) 干粉培育基：避光枯燥，结块后不能运用。 (2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等：冷冻保管，运用时，要常温解冻，防止水浴加热。 (3) 抗生素类：冷藏保管，温渡过高会招致灵敏度的下降。 (4) 兔血浆：冷藏保管大批的白色不会影响结果。

6、 观察时间的掌握：按SN、GB等规范或培育基的运用说明所述时间停止观察，时间过短或时间过长，单菌落的特征都不会很清楚。如单增李斯特氏菌显色培育基，时间短单菌落看不到卵磷脂环，时间长绵羊李氏菌也会发生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此，时间过长，李氏菌使整个平板成黑色，不利于观察单个菌落。

7、 添加剂的添加： (1) 温度的掌握。卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。 (2) 定量。过多会抑制一些目的菌，太少又招致杂菌的过度生长。

8、 培育温度的掌握： (1) 真菌类。25-28℃培育 (2) 细菌类。李氏菌在增菌和生化中要求培育温度在30℃左右。 (3) 其他普通在36℃左右

9、 接种方法：常用的方法主要有划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、涂布接种、液体接种。

10、革兰氏染色方法：染色时间的掌握、冲洗的方法。

11、生化实验： (1) 接种的方法 (2) 氧化型和发酵型实验操作 (3) 阳性菌种的对照 (4) 接种前的纯化。挑取单个菌落停止一系列的生化。

12、关于杀菌的几个概念： (1) 抑制：是在亚抑制剂量因子作用下招致微生物生长中止，但在移去这些因子后生长仍可以恢复的生物学现象。 (2 )死亡：在致死剂量因子的作用下或在亚致死剂量因子长时间的作用下，招致微生物生长才干不可逆丧失，即使移去这种因子后生长仍不能恢复的生物学现象。 (3) 防腐：在某些化学物质或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生长的一种措施，它能防止食物糜烂或防止食物霉变。 (4) 消毒：应用某种方法杀死或灭活物质或物体中一切病原微生物的一种措施，它可以起到防止感染和传达的作用。 (5) 灭菌：应用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的一切病原微生物的一种措施。 (6) 化疗：应用具有选择毒性的化学物质，例磺胺、抗生素等对生物体外部被微生物感染的组织或病变细胞停止治疗，以杀死组织内的病原微生物或病变细胞，但对无机体无毒害作用的治疗措施。

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