茶叶微生物怎么鉴定  【微生物检验技术】 健明迪

在全民关注食品平安的当下，食品微生物检测作为食品平安检测不可或缺的一环，也成为食品平安检测的重中之重。

经过食品微生物检验，可以判别食品加工环境及食品卫生状况，可以对食品被细菌污染的水平作出正确的评价，那么在食品微生物检测中，大家经常会遇到哪些效果？又该如何处置？一同来看一下！

| 01.菌落总数的测定，只做一个稀释度行吗？

| 02.同一个稀释度，菌落总数一个在计数范围，一个不在计数范围，怎样计？

| 03.涂抹样品的检测，应当怎样计数和报告？

| 04.培育基配置有哪些留意事项？

| 05.剩余的培育基再次运用能否重新灭菌？

| 06.霉菌计数如何保证结果准确？

| 07.无菌水、生理盐水、磷酸盐缓冲液三者有什么区别？

| 08.培育皿接种后为什么要倒置？

01 菌落总数的测定,只做一个稀释度行吗？

不可行。在GB 4789.2中要求每个样品选择2-3个适宜的稀释度停止检测。即使一个样品曾经基本可以确定了菌落数了，也建议多检测一个稀释度，多一个稀释度也会对检测结果停止验证，只测一个稀释度会存在风险。

另外假设严厉依照国标要求，这样的检测也是不契合要求的，某些要求严厉的外审部门能够会对此开具不契合项。因此在检测中还是应该严厉依照国度规范执行。

02 同一个稀释度，菌落总数一个在计数范围，一个不在计数范围，怎样计？

同一稀释度的两个平板，一个在计数范围内，一个不在计数范围内，则以在计数范围内的平板的菌落数乘以稀释倍数作为报告结果。

举例来说明，某样品检测结果：10-1两平板菌落数区分为320、288，10-2稀释度两平板菌落数为27、23，则样品的检测结果应选取288停止报告，报告结果为2.9*103CFU/g。

03 涂抹样品的检测，应当怎样计数和报告？

涂抹样品检测的计数是比拟复杂的，给大家举例子来说明！

假设你涂抹的样品面积是25cm²，采样的涂抹液是10mL，而检测只吸取1mL样液，即检测的是原样品的10-1的稀释度，即平板计数菌落*10为样品中的菌落数。结果报告就是菌落数/取样面积。例如，取样面积是25cm²，检测平皿上计数为13，则结果报告应该为13*10CFU/25cm²。

04 培育基配置有哪些留意事项？

(1) 灭菌温度要严厉控制，依照要求灭菌，尤其含糖量较高的培育基温度不应太高，过高会招致糖分焦化，影响质量；

(2) 琼脂培育基不能重复溶化。重复溶化会破坏培育基中的营养成分；

(3) 培育基不能重复灭菌，重复灭菌也会招致营养成分的破坏；

(4) 含琼脂的培育基灭菌后，要摇匀。

05 剩余的培育基再次运用能否重新灭菌？

这分为两种状况。*种状况，曾经凝结后重新消融后运用的，依据GB 4789.28-2013中明白规则，未用完的培育基不可重新凝结留待下次运用。遇到这种状况，培育基只能弃置，并且国标要求，弃置也需求契合相关法律法规的规则。

第二种状况，初次灭菌后未用完的培育基，可待培育基凝结后再停止保管。但保管条件需避光枯燥，保证其成分不会发作改动。再次运用时依照要求停止消融即可，不可二次灭菌。初次灭菌已开封但未运用完的培育基，不建议再次运用，毕竟存在风险。但若是液体培育基，就不存在消融的进程，初次灭菌后未运用终了可依照国标要求保管，运用时需求保证培育基成分不发作改动，不可停止二次灭菌。若无法保证培育基能否契合要求，应当弃置。

06 霉菌计数如何保证结果准确？

霉菌菌落由孢子和菌丝组成，相当分散，在直径9cm的平皿里，菌落数稍多就相互交叉堆叠，影响计数，但数量太少又会发生较大的误差，因此选择适当的稀释度计数是保证结果准确的关键环节之一。

我们对这方面作了一些观察研讨，首先是将实验菌株的斜面培育物制成含有约106个/ml的孢子悬液，并用血球计数器在显微镜下准确计数，然后将孢子悬液作10-1~10-6倍稀释，吸取不同稀释度的稀释液接种于PDA，25℃培育5天后计数。30种罕见霉菌的两种不同计数方法所得结果比拟显示，大局部菌株每平板含有10~50个菌落的稀释度时的计数与显微镜计数结果*接近；有近一半的菌株，每个平板含50~100个菌落已较难计数，而大局部菌株，超越100个/平皿或小于10个/平皿的计数结果就与显微计数结果存在较大差异，因此，应尽量选择10~50个/平皿的稀释度停止霉菌计数。

而对上述提及的菌丝很丰厚、菌落特别分散的毛霉、根霉、犁头霉等菌株，则应在更少的范围内计数(30个/平皿以内)。为控制霉菌的生长速度和菌落的生长范围，可在培育基中添加大批抗生素，如氯霉素(50~100mg/L)，金霉素(20~100mg/L)，庆大霉(50mg/L)，土霉素(100mg/L)等。

07 无菌水、生理盐水、磷酸盐缓冲液三者有什么区别？

无菌水就是复杂的检测水停止灭菌；生理盐水是0.85%的NaCl水溶液；磷酸盐缓冲液普通是选择磷酸二氢钠和磷酸氢二钠依照一定比例配制的缓冲液。

在食品微生物检测中，三者*主要的区别在于对菌的维护作用。无菌水不存在对菌的维护，由于浸透压的作用，还能够形成菌吸水胀裂死亡；生理盐水的浸透压基本与菌的细胞液相当，会对菌有一定的维护。磷酸盐缓冲液除了在浸透压方面对菌有维护作用，对pH也有一定的缓冲作用，因此对菌有更好的维护。国标要求，微生物检测需求用生理盐水或磷酸盐缓冲液稀释。但也有局部研讨标明，检测样品若NaCl含量超越10%也可以运用无菌水稀释，但并未被国度规范认可。

08 培育皿接种后为什么要倒置？

接种后，将平板倒置，既可防止冷凝水滴到培育基上，防止杂菌污染；又利于菌种的生长、繁衍和计数。

1.利于菌种的生长和繁衍

培育条件为必需通风时，倒置的平板可以增加培育基外表的空气活动，减慢培育基中水分蒸发的速度，坚持琼脂等固体培育基中的水分，充沛的维持琼脂等凝结剂的弹性，延伸培育基出现干裂的时间。所以，倒置培育有利于菌种的繁衍和生活。假设将平板正放，大约几天时间培育基就会出现水分流失和开裂的状况。可见，防止培育进程中水分流失是十分重要的。

2.防止培育进程中杂菌污染平板

倒置培育时，由于平板内的空气不易活动，能尽能够的增加外来杂菌的侵染，防止杂菌污染培育基和培育物。经过实验观察，发现假设平板正放，平板的周边容易长出杂菌菌落。

3.有利于营养物质富集，方便观察计数

平板倒置停止微生物培育时，受重力的影响，一方面培育基中的营养物质主要会富集在培育基外表及外表以下的次层，有利于微生物生长；另一方面培育基外表熟长的菌落相对不会太快分散，观察时有利于区分菌落特征。

其它

1）由于如今普通拿平板的操作均为：小盖子朝向手心，五指张开抓住平板，大拇指推进平板的大盖子停止操作，所以倒置平板有利于操作；

2）其他人翻开培育箱的时分一不小心就把平皿盖给翻开了，倒置培育的时分不容易翻开。

以上就是食品微生物检测小编关于食品微生物检测罕见效果的分享，希望能在大家为此困惑的时分有所协助。你们关于食品微生物检测还有哪些阅历或难点呢？欢迎大家在后台留言共同交流讨论。

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