食品微生物检测 实验室微生物检测无菌取样规范操作关键点 健明迪

食品微生物是与食品有关的微生物的总称。包括消费型食品微生物（醋酸杆菌，酵母菌等）和食物蜕变（霉菌，细菌等）和食源性病原微生物（大肠杆菌，肉毒杆菌等）。食品微生物与人类关系严密，对食品微生物的了解、应用、和防治在很早以前就有很大的停顿了。

由于微生物具有种类单一、散布普遍、代谢才干强、生长繁衍快、易培育、易变异、顺应才干强等特点，存在于食品加工、餐饮业等各个环节中，微生物目的如不能到达相关规范，则将危害人类安康，食品微生物检测已是食品平安检测的中的重要项目之一。

检测项目：

阪崎肠杆菌、产气荚膜梭菌、大肠埃希氏菌、大肠菌群、单核细胞增生李斯特氏菌、粪大肠菌群、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、菌落总数、霉菌和酵母、乳酸菌、沙门氏菌检验、商业无菌检验、志贺氏菌、蜡样芽胞杆菌、β型溶血性链球菌、肠杆菌科检验、耐热大肠菌群、铜绿假单胞菌、微生物限制

检测规范：

GB 4789.40-2016食品平安规范 食品微生物学检验 阪崎肠杆菌检验

GB 4789.13-2012食品平安规范 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验

GB 4789.38-2012食品平安规范 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数

GB 4789.3-2016食品平安规范 食品微生物学检验 大肠菌群计数

GB 4789.39-2013食品平安规范 食品微生物学检验 粪大肠菌群计数

GB 4789.10-2016食品平安规范 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验

GB 4789.7-2013食品平安规范 食品微生物学检验 副溶血性弧菌检

GB 4789.35-2016食品平安规范 食品微生物学检验 乳酸菌检验

GB 4789.41-2016食品平安规范 食品微生物学检验 肠杆菌科检验

GB 4789.35-2016食品平安规范 食品微生物学检验 沙门氏菌检验

GB 4789.14-2014食品平安规范 食品微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验

GB 4789.11-2014食品平安规范 食品微生物学检验 β型溶血性链球菌检验

无菌取样抽样操作是整个实验室微生物检测流程的*步，也是首先应当保证的重要环节。经常会有这样的状况：样品检测结果出现异常，我们排查了微生物检测流程的方方面面都没有出现偏向，结果是样品在抽样时曾经被污染。这样的状况理想上并不鲜见，如何根绝呢？还得从规范抽样操作末尾。由于不同类型的样品应采取不同的抽样操作，为了使抽样愈加迷信，下面针对不异样品的抽样操作停止分类论述。

液体样品

普通状况下，液体样品比拟容易取得代表性样品。液态食品普通盛放在大罐中，取样时可延续或间歇搅拌。关于较小的容器，可在取样前将液体上下颠倒，使其完全混匀。取得的样品应放在已灭菌的容器中送往实验室，实验室在取样检测之前应当把液体再彻底混匀一次。

固体样品

依据所取样品资料的不同，所运用的的工具也不同。固态样品常用的取样工具有解剖刀、勺子、软木钻、锯、钳子等，运用前均须灭菌。例如面粉或奶粉等曾经混匀的食品，其成分质量平均动摇，可以抽取大批样品检测。但散装样品就必需从多个点取样，且每个点都要独自处置，在检测前要彻底混匀。肉类、鱼类或相似食品既要在表皮取样，又要在深层取样，深层取样时要小心不要被外表污染。有些食品，如新颖肉类或熟肉可用灭菌的解剖刀和钳子取样；冷冻食品在不解冻的形状下用锯、木钻或电钻，普通斜角钻入来取得深层样品；粉末状样品取样时，可用灭菌的取样器斜角拔出箱底，样品填满取样器后提出箱外，再用灭菌勺从取样器的上、中、下部位采样。

水样

取水样时，*好选用带有防尘磨口瓶塞的广口瓶。关于氯气处置过的水，取样后在100mL水样中参与0.1mL的2%的硫代硫酸钠溶液。取样时应特别留意防止样品的污染，样品应完全地充溢取样瓶。假设样品时从水龙头上取得，龙头嘴的里外都应擦洁净。翻开水龙头让水流几分钟，关下水龙头并用酒精灯灼烧，再次翻开水龙头让水流1-2min后再接样并装满取样瓶。这样的取样方法能确保供供水系统的细菌学剖析的质量，但假设微生物检测的目的是用于追踪微生物的污染源建议还应在水龙头灭菌前取样会在龙头的里外用棉拭子涂抹取样，以检测水龙头自身污染的能够性。从水库、池塘、井水、河流等取水样时，用无菌的器械或工具拿取瓶子和翻开瓶塞，在活动水中取样品是瓶嘴应直接对着水流。大少数国度的官方取样顺序中已明白规则了取样所用器械，假设不具有适当的取样仪器或暂时取样工具，只能用手操作，但取样时，应特别小心，防止用手接触水样或取样瓶外部。

带包装食品

直接食用的小包装食品尽能够取原包装，直到检测前不要开封防止污染；桶装或许大容器包装的液体或固体食品运用无菌取样器由几个不同部位采取，一同放入一个灭菌容器内，不要过度湿润，以防食品中固有的细菌繁衍；关于桶装或大容量包装的冷冻食品，应从几个不同的部位用灭菌工具抽样，使之有充沛的代表性，将样品送达实验室前，要一直坚持样品处于冷冻形状。若样品一旦消融，不可使其再冷冻，坚持冷却即可。

外表采样

经过惰性载体可以将外表样品上的微生物转移到适宜的培育基中停止微生物检测，这阵惰性载体既不能惹起微生物的死亡，也不应使其增殖。这样的载体包括清水、拭子等。要到达微生物既不死亡又不增殖很困难，因此取样后应当尽快停止检测。外表取样技术只能直接转移菌体，不能做系列稀释，只要在菌体数量较少的时分适用，其*的优点是取样进程不破坏样品。常用的外表取样技术包括棉拭子、淋洗法、胶带法等，这里以棉拭子法为例。微生物定性检测时，只需涂抹全部需求检测的外表即可。

而停止的微生物定量检测时，必需先用灭菌取样框确定被测试的区域。用枯燥的棉花缠在4cm长，直径1-1.5mm的木棒或不锈钢棒上做成棉拭子（为了方便也可运用一次性棉签），放进合金试管中，盖上盖子后灭菌。取样时先将拭子在稀释液中浸湿，然后再待测样品外表缓慢旋转拭子平行用力涂抹两次。涂抹进程中应保证拭子在取样框内。取样后拭子重新装回有10mL取样溶液的试管中。

以上就是各种状况下无菌抽样的操作要求。无菌抽样的规范性是保证样品微生物检测准确性的前提，因此我们在取样时应规范操作，确保从源头根绝污染。