动脉粥样硬化家兔模型

动物症状观察：

表现为体重减轻、弓背竖毛，在回输后的一个月后死亡。

实验中涉及动物的操作程序已经得到中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会的批准(ILAS-GC-2012-001)。

1. 与正常对照组相比较模型组家兔的各时间点血脂各项指标检测结果。

饲喂高脂饲料5周的家兔采血为高脂肪血且有乳糜，检测结果CHO（总胆固醇）和LDL-C（低密度脂蛋白胆固醇）明显增高, 比正常对照高出15倍和12倍。 TG（甘油三酯）和HDL-C（高密度脂蛋白胆固醇）也有升高，但相比之下增高不明显。之后继续喂食高脂饲料至11周，TG值一直持续升高至9周，以后才保持平稳，其它血脂指标在喂饲高脂饲料6周至11周均大致趋于平稳，没有出现大幅度升高或者降低的现象；如图1~4所示。

2.大体解剖及组织病理学观察结果

对造模11周的动物进行解剖、取材做病理学方面分析发现。模型组动物主动脉弓及胸主动脉内膜面可见大量灰白色斑块，腹主动脉内膜面可见灰白色斑块，主动脉弓及胸主动脉斑块面积比可达到44%。颈总动脉管壁增厚，大量脂质沉积，泡沫细胞增生。心脏内小动脉壁增厚，管腔狭窄。肝细胞脂肪变性，脾脏中央动脉管壁增厚，管腔狭窄。主动脉弓内膜明显增厚，脂质大量沉积，泡沫细胞增生，灶性坏死，中膜钙化（图5）。

图5.主动脉弓内膜明显增厚，脂质大量沉积，泡沫细胞增生，灶性坏死，中膜钙化

1. 高脂饲料的配方：胆固醇1%、猪油5%、蛋黄粉5%、猪胆盐0.2%和兔基础饲料88.8%。

2. 适应期：适应期动物喂食普通饲料，适应4天。

3. 过渡期：动物每天喂食喂普通与高脂的混合饲料（1:1混合）150g约1周。

4. 造模期：每天喂高脂饲料，每只动物每天喂饲量均为150g，连续喂食11周。

一、 动脉粥样硬化概述

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS） 是由遗传、环境等多因素导致的老年多发性疾病，近年来有逐渐年轻化和上升趋势。随着社会的发展和生活水平的提高，感染性疾病所导致的死亡不断减少，而动脉粥样硬化疾病导致的死亡迅速增多，目前已成为人口死亡的首位原因。

动脉粥样硬化的发病机理学说甚多，如脂质浸润学说、血栓源学说、血液动力学学说、中层平滑肌细胞增生学说、内膜损伤学说及受体学说等，现逐渐明确动脉粥样硬化的发病机理是复杂的，是综合性的较长过程。动脉壁内皮损伤是动脉粥样硬化的始动因素。动脉壁内皮细胞有调节血管张力、血管通透性、抗血栓形成及分泌多种活性物质等重要生理功能。当内皮细胞受某些因素如：高血压、高胆固醇血症、血液中血管紧张素Ⅱ、肾上腺素、去甲肾上腺素、缓激肽的增高，血氧饱和度降低等的刺激均可使血管内皮损伤。受损伤的内皮细胞发生功能改变和渗透性增高，血液中的单核细胞粘附在内皮细胞损伤处进入内皮下，吞噬脂质成为泡沫细胞，形成脂肪斑。血小板聚集并粘附于内皮的损伤处。吞噬细胞、内皮细胞及粘附于内皮细胞损伤处的血小板释放生长因子刺激平滑肌细胞进入内膜并增殖，脂肪斑变成纤维斑块，损伤的内皮细胞通透性改变，血浆中的低密度和极低密度脂蛋白更多地进入内膜，导致动脉粥样硬化。总之，动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病。

动脉粥样硬化的症状主要决定于血管病变及受累器官的缺血程度，主动脉粥样硬化常无症状，冠状动脉粥样硬化者，若管径狭窄达75%以上,则可发生心绞痛、心肌梗塞、心律失常，甚至猝死。脑动脉硬化可引起脑缺血、脑萎缩，或造成脑血管破裂出血，肾动脉粥样硬化常引起夜尿、顽固性高血压、严重者可有肾功能不全。肠系膜动脉粥样硬化可表现为饱餐后腹痛便血等症状。下肢动脉粥样硬化引起血管腔严重狭窄者可出现间歇性跛行、足背动脉搏动消失，严重者甚至可发生坏疽 [6][8]。

二、动脉粥样硬化动物模型简介

积极研究动脉粥样硬化的发病机制,开发有效防治动脉粥样硬化的药物是当今药理学研究领域的重要课题之一,研究并建立可靠的动脉粥样硬化动物模型对于探明As的病因、发病机制及防治具有重要的意义。目前可以作为模型的动物有：大鼠，小鼠，家兔，猴，猪，鸡，鸽子等。其中家兔和鼠是现在研究AS最常用的模型动物，两者比较各有优缺点：家兔不易自发性产生AS，但它对高脂饮食特别敏感，但是家兔的AS病变只与人的病变表面上相似，其病变中的脂类和巨噬细胞含量远比人类大。鼠具有抗AS性，但是作为实验动物，具有经济效益比较高，生存能力强，死亡率低的特点。为此，人们不断摸索建立造型简便且重复性好的AS模型。

兔是最早用以制造高脂血症和动脉粥样硬化症模型的动物，至今仍然多被采用。它对外源性胆固醇的吸收率高，可达75～95%，大白鼠仅为40%，对高血脂的清除能力低，静脉注入胆固醇后脂血症可持续3～4天，大鼠仅为12小时，狗介于两者之间。只要给兔含胆固醇较高的饲料，不必附加其它因素，经3～4月即可形成明显的动脉粥样硬化症，而且与人体发生的病变相似，取血检查也较方便。但是也有些缺点，如必须使血清胆固醇达到很高的水平才能形成斑块，而这时内脏易于发生脂质沉着，动物寿命短，低抗力差，容易继发感染而死亡。再者，兔为草食动物，其酯代谢与人体的酯代谢差异较大；实验发现其冠状动脉病变主要呈现在心脏的小动脉，而人主要发生在冠状动脉的大分支。