主动脉弓缩窄术诱导小鼠肥厚型心肌病模型

心肌肥厚，心功能下降，心肌细胞间胶原沉积，HE染色及马松染色显示心机纤维化样改变，心肌细胞坏死增多。电镜显示心肌细胞缺氧，线粒体形态及功能异常。马松结果显示，TAC手术组心脏出现胶原沉积。手术造模后6-8周，心脏超声检测心功能显著降低，证明心肌病的发生。

实验中涉及动物的操作程序已经得到中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会的批准(ILAS-GC-2012-001)。

超声心动图显示小鼠左心室及室间隔不对称增厚、射血分数降低约20%、心功能显著降低。组织化学检测显示心肌细胞异常肥大，排列方向紊乱出现颗粒状改变。小鼠易猝死。

18-20g雄性C57小鼠，根据体重戊巴比妥钠麻醉，剂量50mg/Kg，仰卧位固定于加热垫上保持体温，颈部及胸前用脱毛膏脱毛，酒精消毒处理，实施气管插管后，使用呼吸机，小鼠呼吸频率120次/分，观察动物呼吸频率与呼吸机同步后，从心脏部位第二肋间隙剪开皮肤，、胸肌、肋间肌，扩胸器撑开肋间隙，显微镊分离胸腺暴露主动脉弓，于无名动脉和左颈总动脉间动脉弓下方放置一小段6.0缝合丝线 ，并围绕动脉弓打活结备用，将27G平头针头插入活结内并与动脉平行放置，拉活结将针和动脉系紧，随即再系一扣，迅速取出针，即获得理论直径为0.4 m m的无名动脉远端主动脉弓手术性狭窄。将胸腺复位，6.0聚丙烯缝合线依次缝合肋间肌及皮肤，观察动物情况，将气管插管拔出，去除固定牙齿皮筋及四肢胶带。腹腔注射给予青霉素0.2ml，注意保暖， 如呈现脱水现象可腹腔注射生理盐水，待苏醒后放回鼠盒。

高血压是由多基因、多环境因素及个人不良习惯相互作用而导致的一种慢性复杂疾病，也是危害人类健康的主要疾病之一。盐是高血压的重要环境因素，个体对盐负荷或限盐呈现不同的血压反应，因此存在盐敏感性问题[1]。盐敏感性是高血压、心脑血管病和其它疾病（如哮喘、胃癌和肾功能不全等）发病及致死的一个潜在危险因素 [2]。因此在高血压临床诊治过程中，考虑盐敏感性将有利于对高血压分类、危险分级以及对症治疗。

盐敏感性通常涉及人口、种族、社会因素以及肾功能、激素水平和饮食习惯等[3]。不同种族和人群盐敏感性个体的检出率不同，而且血压的盐敏感性随年龄增长而变化，特别是高血压患者。盐敏感性由Weinberger ADDIN EN.CITE[4]给出定义：静脉滴注2L生理盐水，测量平均动脉压（MAP），次日早晨给予低钠饮食后再测量MAP，两次MAP相差≥10mmHg为盐敏感性，否则为盐耐受性。Yatabe ADDIN EN.CITE ADDIN EN.CITE.DATA [5]定义盐敏感指数（SSI）为低盐和高盐饮食后MAP的差值与低盐饮食MAP的商，若SSI≥5%为盐敏感性。

高盐摄入引起血压升高主要有两方面原因：一方面是肾小管对Na+ 重吸收增加，导致水钠潴留，血浆容量增加，从而血压升高；另一方面是内源性哇巴因物质分泌增多，特异性抑制钠泵，胞内钠离子浓度增加，Na+/Ca2+交换体被激活，细胞内Ca2+ 浓度升高，最终导致血管平滑肌或心肌收缩，引起高血压[6]，可见钠水调节紊乱是盐敏感性高血压发病的主要诱因。有研究表明，胃肠道在维持机体钠水平衡方面具有重要的作用。人体胃肠道每天大约吸收7～9升液体，这一吸收过程主要是由钠依赖的营养物质同向转运体和钠离子转运体共同介导。在基础状态和进食后，小肠内钠吸收主要是通过钠氢交换体（NHE）。在小肠细胞的顶膜上，将肠腔内的钠转运至小肠细胞的电中性钠氢交换体主要有NHE2、NHE3和NHE8，在结肠中主要的电中性钠吸收通道为ENaC。在这些钠吸收通道中NHE3是非常重要的一个钠离子吸收通道。但小肠NHE3的特异性作用还不清楚。DR. Rieg构建了小肠特异NHE3敲除小鼠VillinCre, 并发现该小鼠成年率为0，均为出生后几天死亡，证实肠道中NHE3调节钠水平衡至关重要。

基于肠道NHE3对于机体钠水平衡的调节作用，相关领域已经开展了NHE3抑制剂药物用于高血压治疗的研究，但是NHE3抑制剂都存在明显的副作用，大鼠及人体实验证实NHE3抑制剂药物能够引发中度或重度腹泻。已有测序研究发现NHE3编码基因SLC9A3与先天性钠腹泻（CSD）密切相关，SLC9A3 基因N端钠离子转运结构域发生突变，能够引发NHE3功能缺失，从而诱导CSD发生。提示直接抑制NHE3的药物虽然能够显著降低血压及钠离子重吸收，但无法解决对机体的副作用。因此，我们研究通过其它通路间接抑制NHE3功能来降低血压。最新研究发现，胃泌素不仅能够调节胃酸分泌，还对机体内肾脏钠氢交换体3（NHE3）等离子泵具有重要的调节作用。同时，我们实验室先前的研究结果也表明，胃泌素能够通过抑制NHE3活性参与机体钠水代谢和血压调节，从而改善盐敏感性高血压大鼠的血压状况。由于小肠中存在大量的胃泌素受体，因此我们采用基因工程的方法，敲除小肠道CCKBR基因以抑制胃泌素对NHE3活性的调节作用，从而造成胃肠道钠水平衡的失调，诱导小鼠盐敏感性高血压模型。