炎症诱导小鼠肠癌模型

AOM诱导肠上皮粘膜产生损伤，DSS诱导炎症，二者联合使用使肠道黏膜上皮处于持续的损伤与修复病程，诱导肿瘤发生。AOM/DSS诱导3 ~ 4周后，小鼠结肠黏膜出现弥散性炎症，上皮隐窝异常，固有层呈现不规则形态并有大量炎症细胞表达（淋巴细胞，浆细胞）。DSS诱导三个循环后在小鼠结直肠部位看到多个腺瘤，部分腺瘤会发生癌变转移。

该小动物模型饲养在清洁级动物中，微生物处于监控状态，动物房有相应的保护措施，小鼠不会出现逃逸，不会对外界环境造成影响。

氧化偶氮甲烷（AOM）经肝乙醇诱导型细胞色素p450亚型（CYP2E1）催化发生羟基化反应生成活性代谢物甲基氧化偶氮甲醇(methylazomethanol, MAM)，随后MAM与葡萄糖醛酸和（或）硫酸盐或谷胱甘肽结合，通过胆汁或血液系统进入肠道，在肠道中被肠道菌群水解酶分解为游离化合物，后经结肠组织酶或细菌和结肠组织激活系统作用，MAM自发分解为甲基碳正离子从而使DNA烷基化。AOM与DSS联合使用后小鼠逐渐出现腹泻、黏液血便、体质量减轻、毛色干枯、肛门脱垂等表现。远端大肠上皮异常增生和腺瘤形成（Adenoma）。

BALB／cA-nu BALB/cA-nu小鼠，胸腺缺失，为第11对染色体隐性遗传，T细胞免疫缺陷，B细胞正常，具有较高的NK细胞活力，无接触敏感性，无移植排斥反应。

制作稳定高表达GFP的细胞，在荧光显微镜下呈强荧光，并且荧光均匀分布于整个细胞内。单克隆GFP细胞在无G418筛选压力下，传代数次后仍能稳定高水平表达GFP（图1）。细胞形态和未转染细胞无明显区别。

图1绿色荧光标记的BGC823细胞系

模型制作采用BALB／cA-nu裸小鼠，鼠龄6周，体重16—20 g。BALB／cA-nu裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的MGC803-eGFP肿瘤细胞，稀释至5×106cells／mL。取200μL细胞悬液进行皮下注射接种。

按照10-15mg/kg体重单次腹腔注射AOM，然后给予2.5%DSS饮水5天，16天正常饮水，共三个循环。