Traj18基因敲除免疫缺陷小鼠模型

该品系可用于NKT细胞相关的多种疾病及发育相关研究。

动物模型的制备和应用实验必须在具备相应资质的实验室开展。动物模型的制备、应用过程中的监督管理、处置措施、对环境和生态影响等应符合国家相关法律规定。

通过流式细胞仪对敲除小鼠的胸腺、脾脏和肝脏的NKT细胞进行了分析，包括B220、CD3ξ，CD4，CD8α，TCRβ，相关的标记购买自BD公司。为验证该基因对肿瘤的抵抗作用，选取肝脏转移的B16黑色素瘤，对小鼠进行静脉注射，同时选择αGalCer-DC细胞注射作为另一实验组。

流式细胞仪分析，Traj18基因敲除小鼠的NKT细胞在胸腺、脾脏和肝脏都没有表达：

接种肿瘤实验表明，该敲除小鼠对肿瘤的耐受能力下降:

背景小鼠：C57BL/6J

构建信息：应用CRISPR/Cas介导的基因组工程技术建立 Traj18基因敲除小鼠模型；小鼠Traj18基因(Gene ID: 100124371)位于小鼠14号染色体上，小鼠的Traj18基因为目的位点：

将构建两对gRNA靶向载体，并经测序证实。体外转录产生的Cas9mRNA和gRNA将被共同注射到受精卵中，以促进KO小鼠的产生。用PCR进行仔鼠基因分型，然后进行序列分析；将Traj18基因的gRNA和Cas9mRNA共注射到受精卵中，以产生有针对性的敲除后代。通过PCR鉴定F0代首建鼠，随后进行序列分析，然后与野生型小鼠繁殖获得F1代，再进行鉴定，F1代再进行繁殖，最终获得纯合子小鼠。PCR反应体系及条件为

天然杀伤T细胞（NKT）是T淋巴细胞的一个独特的子集，它通过细胞因子的快速释放和与免疫系统其它细胞直接作用来调节免疫反应。因此NKT细胞作为先天和适应性免疫系统之间的重要联系，是免疫疗法的有前景的靶点。I型NKT细胞，也称iNKT细胞，是小鼠中最常见的NKT细胞，在人类中具有相似的特性。

TRAJ18基因与TRAv11基因结合，形成具有适当抗原特异性的iNKT细胞受体（Tcr）。有报道指出敲除TRAJ18基因的小鼠，约60%的TCRα多样性缺乏。

参考文献：

1. Lower TCR repertoire diversityin Traj18-deficient mice.

2. Generation of NovelTraj18-Deficient Mice Lacking Vα14 Natural Killer T Cells with an Undisturbed TCell Receptor α-Chain Repertoire.

3. Mutation of the Traj18 genesegment using TALENs to generate Natural Killer T cell deficient mice.