于化妆品功效评价的皮肤细胞类型介绍 《化妆品功效宣称评价指导原则》起草说明

皮肤细胞培育技术可模拟人体内的生理环境，研讨细胞与细胞之间的反响，细胞与间质之间的反响等，具有快速、经济的特点，既可用来毒性剖析，也可停止成效评价，是保证化装品平安、有效的必要手腕，为皮肤生理学等提供了技术基础。

一、人永生化角质细胞（Human immortalized keratinocytes，HaCaT 细胞）

角质构成细胞（KC）的体外培育技术曾经十分成熟，其生长较快、细胞存活率较高，但也易老化且传代次数较少，所以在化装品成效评价中通常会运用HaCaT细胞（即非肿瘤来源的永生化人正常皮肤的KC株，与KC分化特性相似，具有易于培育、传代次数多的优点）。

1、HaCaT细胞运用于保湿成效评价

HaCaT细胞可分解透明质酸（Hyaluronic acid，HA）、水通道蛋白（Aquaporin，AQP）、严密衔接蛋白（Tightjunction protein，TJP）以及丝聚蛋白（Filaggrin，FLG）等与皮肤保湿相关的生物分子。因此，可以经过检测化装品原料对HaCaT细胞中AQP、claudin-1（claudin-1是TJP中构成表皮细胞旁屏障的主要跨膜蛋白）和FLG等保湿相关蛋白含量的影响来反映其保湿才干，对保湿化装品停止成效评价。

不过如今停止保湿成效测试普通会经过人体实验的方法，这样更直观一些，HaCaT细胞测试可用于研讨原料的保湿机理。

2、HaCaT细胞运用于抗氧化成效评价

活性氧（ROS）过量会对DNA和蛋白质发生氧化损伤；丙二醛（MDA）是生物体内自在基作用于脂质发作过氧化反响的终产物。因此，经过检测其中HaCaT细胞内ROS和MDA的含质变化可反映出细胞内氧化应激的水平， 评价化装品原料的抗氧化才干。

超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）可用于用于肃清或降低氧自在基形成的损伤。因此，经过检测SOD、CAT和GSHPX的生机，可反映化装品原料对HaCaT细胞内自在基的肃清才干的影响，以此来评价化装品原料的抗氧化才干。

例如，王茵等人经过测量小鼠肝脏组织的抗氧化酶系统活性（SOD，GSHPX，AOC（总抗氧化才干），MDA，NO（一氧化氮））来研讨虾青素的抗氧化效果。*终结果显示虾青素可提高小鼠肝脏和血液中的SOD，GSHPX，AOC等活性目的，降低MDA和NO的浓度，即虾青素具有抗氧化才干。

二、小鼠B-16黑色素瘤细胞（简称B-16细胞）

黑素细胞（Melanocyte，MC）是皮肤内的一种特殊细胞，它位于表皮的基底层，细胞内的黑素小体（Melanosomes）能分解黑色素（Melanin），并转移到周围的角质构成细胞中，为皮肤提供颜色。但是黑素细胞的增殖比拟缓慢，所以常用B-16细胞替代黑素细胞停止细胞实验。（B-16细胞在基本结构与黑色素分解功用方面与人黑素细胞基本相反，且增殖才干更强，可以屡次传代，适宜用于实验研讨）。

B-16细胞可运用于美白成效评价，例如马佳等研讨了壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞黑素分解的影响。与空白对照组比拟‚ 0.1 mmol//L壬二酸即显示抑制人表皮黑素细胞的酪氨酸酶活性和黑素的分解，同等浓度的壬二酸对鼠黑素瘤B16细胞的酪氨酸酶活性和黑素分解也有抑制造用。

三、人皮肤成纤维细胞（Human skin fibroblast，HSF）

HSF是皮肤真皮层中*主要的细胞，关于维持皮肤的弹性和张力具有重要的作用。HSF具有很强的蛋白质分解才干，可以分解并分泌少量弹性蛋白、胶原蛋白、糖胺多糖和糖蛋白等基质成分，进而生成弹性纤维、胶原纤维和网状纤维，分泌多种细胞修复因子，使得皮肤具有弱小的更新与自我修复才干。

人皮肤成纤维细胞可运用于抗衰老成效评价，例如郑雯等研讨了白藜芦醇对UVB照射的人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶（MMP-1）水平及细胞凋亡的影响，即白藜芦醇对紫外线照射皮肤的光维护作用。结果标明白藜芦醇能经过抑制UVB照射所形成的人皮肤成纤维细胞MMP-1水平增长，使皮肤真皮组织胶原蛋白的分解增加，从而延缓紫外线照射对皮肤形成的损伤和老化进程。

四、人角质构成细胞（HKC）

人角质构成细胞系一种能分解角质蛋白的上皮细胞。此类细胞为表皮的主体，由表皮深层始逐渐增殖、分化，并不时向表层移行，其间可分红几个层次，表皮*深层为基底层，向上依次为棘层、颗粒层、角质层，角质蛋白亦依生长层次逐渐分解。

人角质构成细胞是表皮中*重要的细胞之一，它可以反映表皮的安康形状，所以也有少量的研讨人员将它运用于化装品原料的研讨与运用，例如王刚等经过实验证明阿魏酸是经过影响HKC下游炎症因子如TNF-α和IL-8分泌，从而参与调理免疫反响的信号传导机制，到达对HKC的维护作用。

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参考资料：

[1] 郭立群. 化装品成效评价(Ⅶ)-细胞生物学在化装品成效评价中的运用. 日用化学工业. 2018.

[2] 马宇晨. 用于化装品成效评价的皮肤细胞类型、特点及运用概略. 日用化学工业. 2021.

[3] 关英杰. 皮肤细胞培育技术在化装品成效研讨中的运用. 日用化学工业. 2002.

[4] 王茵. 自然虾青素的抗疲劳及抗氧化作用研讨. 西南大学学报（自然迷信版）. 2015.

[5] 马佳. 壬二酸对人黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞黑素分解功用的影响. 安徽医科大学学报. 2006.

[6] 郑雯. 白藜芦醇对UVB照射的人皮肤成纤维细胞MMP-1水平及细胞凋亡的影响. 中国皮肤性病学杂志. 2012.

[7] 王刚. 阿魏酸对人角质构成细胞的维护作用. 医药导报. 2011.

《化装品成效宣称评价指点准绳》

起草说明

为规范和指点我国化装品成效宣称的评价任务，配合《化装品监视管理条例》的实施，国度药品监视管理局组织起草了《化装品成效宣称评价指点准绳》（征求意见稿）（以下简称“指点准绳”）。现就起草任务的有关状况说明如下：

一、必要性

依据《化装品监视管理条例》第二十二条的要求，化装品的成效宣称应当有充沛的迷信依据，且化装品注册人、备案人应当在国务院药品监视管理部门规则的专门网站发布成效宣称依据的相关资料，接受社会监视。目前，除防晒及防晒产品的防水成效需求依据《化装品平安技术规范》的要求停止成效评价外，并未对其他化装品成效宣称提出要求。

为保证消费者的合法权益，规范行业行为和促停止业安康开展，经过对现有化装品成效宣称评价体系、国际外评价方法及评价部门/机构的调研剖析，结合我国化装品法规要求及行业实践状况，起草本指点准绳，为化装品成效宣称评价任务提供指点依据。

二、主要内容

（一）坚持迷信性和可行性。普遍参考欧、美、日、韩相关法规、行业/学术组织发布的成效宣称评价方法和文献资料的基础上，充沛结合我国行业现状，对化装品成效宣称评价的内容、范围、责任主体、总体准绳、方法选择和机构选择等提出基本要求。

（二）坚持行业自律及规范性。规则化装品注册人、备案人应当实行其主体责任，在国度药品监视管理局规则的网站向社会地下化装品成效宣称依据的摘要，经过社会监视的方式，而不是行政审批来处置成效宣称的真实性效果。

三、需求重点说明的效果

（一）关于成效宣称评价范围。依据国际外对成效化装品的分类和我国《化装品分类规则和分类目录》（征求意见稿）中的成效宣称分类用语，对比研讨后发现“防脱发、防晒、祛痘”等化装品的运用风险较高，上述几类产品有的在美国作为“OTC药品”；或在日本作为“医药部外品”；或在韩国作为“医药外品”严厉管理。《指点准绳》规则了化装品成效宣称评价准绳，消费者可经过感官识别的，或产品经过物理作用发失效果且在标签中明示的，可豁免提交成效宣称评价资料。

（二）关于成效宣称评价机构。化装品成效宣称评价的责任主体为化装品的注册人、备案人，可自行或委托具有相应才干的评价机构承当成效宣称的评价任务。防晒、祛斑美白、防脱发和新成效应委托化装品注册备案检验机构评价和方法验证。

（三）关于成效宣称评价方法。评价方法可选用国际外相关法规、规范、规范规则的方法，威望组织或技术机构及行业协会指南、专业学术杂志地下宣布方法等，也可运用阅历证的实验室自拟方法。同一成效宣称有多种可选择的评价方法时，应优先选择我国现行法律法规、国度规范或技术规范中的方法。防晒、祛斑美白、防脱发成效宣称评价选择《化装品平安技术规范》以外的方法时，需停止方法验证。

（四）关于祛斑美白成效评价交叉参照。思索到我国的行业现状，在调研了祛斑美白成效作用机制、影响成效发扬的主要要素及祛斑美白成效评价方法的基础上，参考防晒化装品管理阅历，对祛斑美白成效评价交叉参照提出准绳性要求。

（信息来源：化装品检定所；编发：北京天健华成国际投资顾问有限公司化装品注册部 http://www.zhuceabc.cn）