病毒保存液检测

1. 病毒保存液检测对象
毒株：甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
细胞：MDCK细胞
2.病毒保存液检测步骤：
1）取样品病毒保存液（非灭活型） 9.8mL，加入0.2mL病毒原液混匀，分装若干测试液，存至要求温度；
2）保存至对应天数后取出测试液，检测病毒滴度；
a）10倍倍比稀释测试液；
b）将稀释液加入含生长至单层的MDCK细胞的96孔细胞培养板上，并设置正常对照组，加等量培养液；
c）置于35'C、5%CO2的培养箱中孵育60 min后弃去上清液，加入双抗400 IU/mL的维持培养液继续孵育3~5天，每天观察细胞增长状况；
d）当接种病毒的MDCK细胞出现变圆或缩小等病变现象时，记录产生细胞病变的情况；
e）根据Reed-Muench公式计算半数感染量TCID50。

病毒保存液是一种病毒采样管内添加的专门用来保护鼻咽拭子采样后样本的保护型液体介质。病毒保存液起到保存病毒样本的作用，既保证了核酸病毒的完整性，又便于后期的检测准确性，病毒保存液检测目的验证病毒灭活效果。
目前市面上有两种病毒保存液，分别是灭活型病毒保存液和非灭活型病毒保存液。
灭活型病毒保存液是为了裂解和灭活病毒的，它可以保护检测人员不受病毒的第二次感染伤害。灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解性保存液，里面添加有高浓度的裂解盐，能够迅速高效地使待测样本里的病毒蛋白裂解失活，同时又含有RNA酶抑制剂，这样既能保护病毒核酸不被降解，又能保证核酸的完整性而不影响后续的检测结果。在常温下也可以保存相对较长的时间，节省了病毒样本和运输的成本。
非灭活型病毒保存液是为了保留病毒的蛋白质外壳以及病毒核酸DNA或者是RNA，这样就可以保证病毒样本核酸在送检过程中的完整性，虽然操作失误时会也有一定的感染性风险，但是这种保存液最大程度地保持了病毒样本的原始性，是一种培养型的病毒运输介质，需要注意的是长时间保存的需要在采样后保持严格的低温保存。

健明迪检测可开展针对流感病毒、肠道病毒、冠状病毒、疱疹病毒等病毒保存液病毒灭活效果检测，病毒保存液检测可针对不同保存温度、不同保存时间等不同条件下的病毒活性及病毒灭活率。

病毒保存液检测报告模板主要包含试验毒株、实验批次、保存温度、保存天数、病毒滴度、病毒活性及病毒灭活率等检测数据，具体如下图：

健明迪检测可开展针对流感病毒、肠道病毒、冠状病毒、疱疹病毒等病毒保存液病毒灭活效果检测，病毒保存液检测可针对不同保存温度、不同保存时间等不同条件下的病毒活性及病毒灭活率。